較早公告: 數顯黴菌培養箱的使用注意事項數顯黴菌培養箱是一種常用的培養箱废柴,是水體分析和BOD測定,細菌、黴菌、微生物的培養、保存、植物栽培、育種試驗的專用恒溫設備。數顯黴菌培養箱是黴菌、微生物的培養及育種試驗的專用培養裝置,特別實用于生物工程、化工、醫學研究、農林科學、水産、畜牧等領域從事科研和生産使用的理想的設備。數顯黴菌培養箱采用微處理器控制,具有監測、控制溫度和保護等功能,數顯黴菌培養箱在使用過程中應注意問題:數顯黴菌培養箱在使用過程中應注意以下問題:1、使用前應閱讀全部使用說明書,數顯黴菌培養箱
废柴搜索
废柴目錄
废柴
    公司名稱:常州市頂新實驗儀器有限公司
    废柴:江蘇省常州市金壇區金湖路29號
    废柴:213200
    废柴:0519-82328967
    废柴: 13921008373
    废柴: 王磊
    废柴:0519-82328967
    废柴: 841475174@qq.com
技術文章當前您的位置:废柴 > 技術文章
组织捣碎勻漿機關于動物固體組織蛋白的提取
点击次数:1044 发布时间:2018-12-24
   JJ-2组织捣碎勻漿機關于動物固體組織蛋白的提取
  1.前夜將磁珠及勻漿管洗淨置入75%乙醇中浸泡。早晨取出磁珠和勻漿管,自然晾幹;也可放入烤箱中,速度較快。
  2.裂解液配制:RIPA:PMSF=100:1,現配現用。置入4℃冰上。
  3.抽蛋白:
  適量組織加入裂解液中。
  勻漿操作。
  手工勻漿:將剪碎的組織倒入玻璃勻漿管中,再將剩余的1/3勻漿介質或生理鹽水沖洗殘留在燒杯中的碎組織塊,一起倒入勻漿管中進行勻漿,左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗杆垂直插入套管中,上下轉動研磨數十次(6-8分鍾),充分研碎,使組織勻漿化。
  机器匀浆:用JJ-2组织捣碎勻漿機上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织勻漿機制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5次,在冰水中进行),皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
  超声粉碎:用超声粉碎機进行粉碎,可用超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎,也可用国产超声波发生仪,用40安培,5秒/次,间隙10秒反复3-5次。
  反複凍融:培養或者分離的細胞可以用以上的方法勻漿,也可以反複凍溶3次左右(即讓細胞加適量的低滲液或者雙蒸水放低溫冰箱中結冰,溶解,再結冰,再溶解,反複3次左右),但有部分酶活力會受影響。
  将组织匀浆转入1.5ml的EP管中(离心管)。12000r/min 4°C离心15min。
  離心後EP管中液體分三層,提取中間無色液相,移入新的EP管中。可-80℃保存。
  大多數蛋白樣品可通過比色測定法定量。在典型的蛋白測定中,化學試劑加入到蛋白樣品溶液裏産生顔色變化,這一變化可由分光光度計或酶標儀檢測,並與已知濃度的蛋白標准曲線作比較。如果樣品數量較多,可以同時使用兩種測定用酶標儀自動檢測。當你選擇一種蛋白測定方法時需要考慮兩個因素:緩沖液的化學組成和檢測的蛋白量。
常州市頂新實驗儀器有限公司(www.czdxyq.com)主營:分液漏鬥振蕩器,SHP隔水式电热培养箱,SPJ-150數顯生化培養箱,XA-1固体样品粉碎機,DB-1不鏽鋼電熱板
废柴:化工儀器網 管理登陸 ICP废柴:蘇ICP備13042025號-1
 

化工儀器網

高級會員

高級會員

7

推薦收藏該企業網站
掃一掃訪問废柴站掃一掃訪問废柴站
訪問废柴站